如果您曾经成功连接过360手机助手，但突然再次连接失败，可以尝试以下方法来解决这个问题：
1. 检查连接设备：确保您的手机和电脑都开启并且处于良好的工作状态。确保USB连接线完好无损，并且与手机和电脑都连接紧密。
2. 重新启动手机助手：退出360手机助手并重新启动它，看是否能够解决问题。
3. 检查驱动程序：确保您的电脑已经安装了正确的手机驱动程序。如果没有安装或驱动程序已损坏，您可以访问360手机助手的官方网站，下载并安装最新的驱动程序。
4. 检查USB调试模式：确保您的手机已经开启了USB调试模式。在某些情况下，连接失败可能是因为该模式未开启。您可以在手机的开发者选项中查找并开启它。
5. 更新软件版本：检查您的360手机助手和手机的软件版本是否为最新。如果不是最新版本，请更新到最新版本以获取更好的兼容性和修复可能存在的问题。
6. 使用其他电脑尝试连接：如果以上方法都无法解决问题，您可以尝试将您的手机连接到另一台电脑上，看看是否能够成功连接。这有助于确定问题是否仅限于您的当前电脑。
7. 检查安全软件和防火墙设置：某些安全软件和防火墙可能会阻止手机与电脑的正常连接。请检查您的安全软件和防火墙设置，确保它们不会阻止360手机助手的正常运行。
如果以上方法都无法解决问题，建议您联系360手机助手的官方客服支持，他们可能能够提供更具体的帮助和解决方案。
